一个基因操作方面的题目

长白脚下问题未开放回答 2018-12-31 115 科普
一个基因操作方面的问题
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通过blastP对该新蛋白序列进行同源性比对,确定保守区;反推确定核酸位置并通过blastN进行同源性比对,确定保守区;提HeLa细胞总RNA后反转录,针对保守区设计引物以反转录后得到的cDNA为模板进行PCR,产物克隆测序后使用primer进行翻译得氨基酸序列,与新蛋白A进行比对,确定所得PCR产物编码新蛋白A;使用所得PCR产物构建表达载体并转化相应宿主菌,纯化得到相应蛋白(全蛋白A或部分蛋白);用纯化得到相应蛋白(全蛋白A或部分蛋白)免疫动物后得血清,该血清含A蛋白的多克隆抗体;用含A蛋白的多克隆抗体与HeLa细胞孵育后加入荧光二抗(抗被免疫动物的抗体),荧光素分子标记亚细胞结构后上荧光显微镜观察。
DJB08006960 2018-12-31 15:05:52 0条评论
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